各省、自治区、直辖市司法厅（局），新疆生产建设兵团司法局、监狱局：

　　为切实加强司法鉴定标准化工作，保证鉴定质量，适应司法鉴定工作需求和科学技术发展，司法部组织有关专家对2010～2011年颁布的《亲权鉴定技术规范》等8项司法鉴定技术规范进行了修订，现予印发，推荐适用。自印发之日起，该8项技术规范旧版废止，不再适用。

　　司法部办公厅

　　2016年9月22日

血液中乙醇的测定

顶空气相色谱法

SF/Z JD0107001——2016

    言

本技术规范按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。

本技术规范的附录A和附录B为资料性附录。

本技术规范由司法部司法鉴定科学技术研究所提出。

本技术规范由司法部司法鉴定管理局归口。

本技术规范起草单位：司法部司法鉴定科学技术研究所。

本技术规范主要起草人：卓先义、刘伟、向平、沈保华、卜俊、马栋、严慧。

本技术规范所代替规范的历次版本发布情况为：SF/Z JD0107001——2010。

本技术规范规定了血液中乙醇的顶空气相色谱测定方法。

本技术规范适用于血液中乙醇的定性及定量分析。

本技术规范的方法检出限为0.01mg/mL；定量下限为0.05mg/mL。

下列文件对于本技术规范的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本技术规范。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本技术规范。

GB/T6682  分析实验室用水规格和试验方法（GB/T 6682-2008，ISO 3696：1987，MOD）

GA/T122  毒物分析名词术语

除另有说明外，水为GB/T6682规定的二级水。

色谱纯。

精密称取适量乙醇，用水配成10.0mg/mL乙醇标准储备溶液。储备液在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为6个月。试验中所用其它浓度的标准溶液均从上述储备液稀释而得，在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为3个月。

色谱纯。

精密称取适量叔丁醇，用水配成5.0mg/mL叔丁醇储备液。储备液在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为12个月。将储备液用水稀释，得40.0μg/mL叔丁醇内标工作液，在冰箱中冷藏密闭保存，有效期为6个月。

配火焰离子化检测器（FID）。

配1mL定量进样环。

10mL，顶空自动进样器用。

用精密移液器或自动稀释仪取待测血液0.10mL及0.50 mL 40.0μg/mL 叔丁醇内标工作液，加入样品瓶内，盖上硅橡胶垫，用密封钳加封铝帽，混匀。

6.2.1　顶空气相色谱测定参考条件

a） 色谱柱（1）：DB-ALC1（30m´0.32mm´1.8mm）石英毛细管柱或相当者；

柱温：恒温40°C；

色谱柱（2）：DB-ALC2（30m´0.32mm´1.2mm）石英毛细管柱或相当者；

柱温：恒温40°C；

b）载气：氮气，纯度≥99.999%，流速8mL/min；

c）进样口温度：150°C；

d）检测器温度：250°C；

e）加热箱温度：65°C；

f）定量环温度：105°C；

g）传输线温度：110°C；

h）气相循环时间：3.5min；

i）样品瓶加热平衡时间：10.0min；

j）样品瓶加压时间：0.10min；

k）定量环充满时间：0.10min；

l）定量环平衡时间：0.05min；

m）进样时间：1.00min。

6.2.2　定性测定

样品溶液按照顶空气相色谱测定条件测定，以叔丁醇为内标，记录色谱峰的保留时间。将待测样品色谱峰的保留时间与乙醇标准对照品的保留时间比较，相对误差在±2%内，空白对照样品内标物色谱峰正常而无乙醇的色谱峰，一般可以认为待测样品中含有乙醇；必要时，选择不同的色谱条件或用气相色谱-质谱法确证。如果内标物色谱峰正常，而无乙醇的色谱峰时，可认为检验结果为阴性。乙醇对照品和内标气相色谱图，参见附录A。

6.2.3　定量测定

本方法采用内标法－校准曲线法或内标法－单点校正法定量测定。

6.2.3.1 内标法－校准曲线法

采用内标-校准曲线法测定（见附录B）。将乙醇对照品溶液进样，以乙醇和内标峰面积比为纵坐标，乙醇对照品工作溶液浓度为横坐标绘制标准曲线，用标准曲线对待测样品进行定量，所测样品中乙醇的浓度值应在线性范围内。

6.2.3.2 内标法－单点校正法

待测血液样品乙醇浓度在标准溶液浓度的±30%内可用单点法定量。

按以上步骤对同一待测样品进行平行试验。

10％（有凝血块的血样不超过15％）。双样相对相差按式（1）计算：

                                    | C₁ - C₂|

双样相对相差（%） = ¾¾¾¾¾´ 100     ………………………………（1）

                                      `C

式中：

C₁、C₂¾¾两份样品平行定量测定的结果；

`C ¾¾两份样品平行定量测定结果的平均值(C₁+C₂)/2。

双柱双检测器两份样品测定结果的相对标准偏差RSD（%）若不超过5％时（有凝血块的血样不超过10%），结果按两份样品结果的平均值计算。

血液中乙醇浓度测定采用内标法－校准曲线法定量或按式(2)计算：

                                 A´ A_i′´c         

                   C = ¾¾¾¾¾¾         …………………………………（2）

                                  A′´A_i            

式中：

C¾¾血液样品中乙醇浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)；

A¾¾血液样品中乙醇的峰面积；

A′¾¾标准溶液中乙醇的峰面积；

A_i′¾¾标准溶液中内标物的峰面积；

A_i¾¾血液样品中内标物的峰面积；

c¾¾标准溶液中乙醇浓度，单位为毫克每毫升(mg/mL)。

附　录　A

乙醇对照品和内标气相色谱图

A.1 按色谱柱（1）条件得乙醇对照品和内标气相色谱图，见图A.1。

图A.1 按色谱柱（1）条件得的乙醇对照品和内标气相色谱图

A.2 按色谱柱（2）条件得乙醇对照品和内标气相色谱图，见图A.2。

图A.2 按色谱柱（2）条件得的乙醇对照品和内标气相色谱图

附　录　B

校准曲线

配制乙醇浓度为0.10、0.20、0.50、0.80、1.00、2.00、3.00mg/mL的水溶液，按6.1和6.2项下分析，每一浓度点取2份，以乙醇与内标叔丁醇的峰面积比对乙醇浓度做标准曲线。

按色谱柱（1）条件测得的标准曲线方程为X = 1.0761 C - 0.0162（r = 0.9997），按色谱柱（2）条件测得的标准曲线方程为 X = 1.0655 C - 0.0177（r = 0.9997）。式中X为乙醇与叔丁醇的峰面积比值，C为乙醇工作溶液浓度(mg/mL)。

 来源：司法部政府网