NGS测序原理梳理03-边合成边测序
继上一步簇在flow cell上生成后，下一步就开始测序。
illumina 测序原理
dNTP连接；
扫描照相；
切除叠氮基和标记的荧光基团；
1）4通道测序仪SBS原理
dNTP连接
扫描照相
切除叠氮基和标记的荧光基团
这个循环完成后，加入化学试剂把叠氮基和标记的荧光基团切掉，进行下一个循环（碱基的连接、扫描照相与切除）。如此重复直至所有链的碱基序列被检测出，也就是Read1 序列。
2）2通道测序仪SBS原理
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测序过程
杂交Read 1 引物
dNTP特点：
被荧光基团标记，每种碱基标记的荧光基团不一样（具有独特的荧光波长，会发出不同颜色）；
dNTP 3’末端连了一个叠氮基，这个叠氮基能够阻断后面的碱基与它相连，一次只能连接一个dNTP。
正义链测序
测序
洗脱
index1测序
测序
洗脱
去掉成簇时所阻断的3'端
index2测序
测序
洗脱
桥式扩增反义链
扩增
双链变性
正义链被切除
反义链测序
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数据分析
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参考资料
https://www.bilibili.com/video/BV15s411t7SJ
https://www.bilibili.com/video/BV1ht411q7Wh
https://www.illumina.com.cn/
至此，illumina 测序的文库构建，簇生成，边合成边测序及数据拆分结束，点击会看：
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